Cultura in vitro de embriões imaturos em ameixeira europeia

Abstract

Foram colhidos semanalmente, desde os 7 aos 70 dias após a polinização (DAP), frutos de Prunus domestica cv. ‘Rainha Cláudia Verde' provenientes de polinização livre. Com o objectivo de obter plântulas, foram extraídos os óvulos e/ou embriões e os eixos embrionários e testados três meios de cultura base, adicionando ou não diferentes tipos de reguladores de crescimento (auxina, giberelina e citocinina) e amino-ácidos (caseína hidrolisada 500 mg/l), tendo-se também variado a concentração de sacarose (2 e 10%). Foi ainda testada a técnica de perfuração da testa do óvulo e a influência do frio (30 dias a 4°C), na quebra de dormência dos embriões e eixos embrionários. Os resultados mostram que, aos 49 DAP quando comparámos a cultura do embrião dentro do óvulo perfurado, com a cultura do embrião isolado no meio de cuhura, verificámos que esta última conduziu a um melhor desenvolvimento do embrião e a percentagens de sobrevivência mais elevadas. Para os embriões no início da fase cotiledonar (49 DAP; PF1=11), o meio de cultura de Chée & Pool (1987) com 2% Sacarose +Caseína Hidrolisada (500 mg/1), demonstrou ser o mais adequado para o crescimento e sobrevivência dos embriões, quando comparado com os meios Nitsch & Nitsch (1969) e Stewart & Hsu (1977). Os embriões colocados neste meio de cultura apresentavam um comprimento médio inicial de 1,62 mm e atingiram em média os 5,31 mm, ao fim de 60 dias em cultura. No entanto, só foi possível obter plântulas a partir de embriões em plena fase cotiledonar (56 DAP; PF1=44). Neste estádio de desenvolvimento, o frio teve um efeito positivo tanto na percentagem de germinação como na qualidade das plântulas obtidas. Para os embriões em plena fase cotiledonar o meio de cultura Nitsch & Nitsch (1969) com 2% Sacarose +BAP (0,1mg/l.) +2,4-D (0,1mg/l), mostrou ser o mais adequado para a germinação, contudo, as plântulas obtidas apresentaram baixa qualidade. ### Abstract - The fruits of Prunus domestica cv. `Rainha Cláudia Verde' subject to opera pollination were picked weekly, from 7 to 70 days after pollination (DAP), with the aim of obtaining seedlings; the ovules and/or embryos and axis were extracted and placed in three different media with different concentrations of growth regulators (auxin, cytokinin and gibberellin), acid amino (casein hidrolysate 500 mg/l) and sacarose (2 and 10%). The ovule perforation technique and cold treatment (30 days at 4°C) were also applied to break down dormancy of the embryos and the embryonic axis. The results show that, compared to the ovule culture, the isolated embryo culture, at 49 DAP, gives a better embryo growth and a higher percentage of survival. The most adequate mediam for the growth and survival of the embryos at the early cotiledonar stage (49 DAP, PF1=11) proved to be the Chée & Pool medium (1987) with 2% sacarose+ Casein Hidrolysate (500 mg/l), as compared to the Nitsch & Nitsch medium (1969) and Stewart & Hsu medium (1977). The embryos that were placed in this medium initially had an average length of 1.62mm and after 60 days in the medium they had obtained an average length of 5.31mm. However, it was only possible to obtain seedlings from embryos at the cotiledonar stage (56 DAP, PF1=44). At this stage of development, the cold treatment had a positive effect, both for the percentage of germination and for the quality of the seedlings. For the embryos at the cotiledonar stage the Nitsch & Nitsch medium (1969) with 2% sacarose + BAP(0.1 mg/1)+ 2,4-D(0.1 mg/1) proved to be the most successful one for germination, however, the quality of these seedlings was poor.